植物類黃酮（Flavonoid）試劑盒-相關(guān)技術(shù)文章

更新時間：2025-02-17

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植物類黃酮（Flavonoid）試劑盒說明書

微量法 100T/96S

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

類黃酮是一類多苯化合物，屬于植物次生代謝物，對人體具有消炎，抗菌，降血脂，清除體內(nèi)羥自由基，預(yù)防癌癥等作用。

在堿性亞硝酸鹽溶液中，類黃酮與鋁離子形成在 510nm 處有特征吸收峰的紅色絡(luò)合物，測定樣品提取液在 510nm 處的吸光值，即可計算樣品類黃酮含量。

自備儀器和用品：

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。

將樣本烘干至恒重，粉碎，過 40 目篩之后，稱取約 0.02g，加入 2ml 提取液，60℃振蕩提取 2h，10000g， 25℃，離心 10min，取上清待測。

1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 500nm，蒸餾水調(diào)零。

2、操作表

	空白管	測定管
樣本待測液（µl）		108

蒸餾水（µl）	108
試劑一（µl）	6	6
混勻，25℃靜置 6min
試劑二（µl）	6	6
混勻，25℃靜置 6min
試劑三（µl）	80	80
混勻，25℃靜置 15 min，測定 510nm 處吸光值。ΔA=A 測定-A 空白，空白管只要做一管。

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 5.02x+0.0007，R² = 0.9996

類黃酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷5.02÷(W÷V 樣總)= 0.398×（ΔA -0.0007）÷W V 樣總：加入提取液體積，2.5ml； V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.108ml； W：樣品質(zhì)量，g b.用 96 孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 2.51x+0.0007，R² = 0.9996

類黃酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷2.51÷(W÷V 樣總)= 0.797×（ΔA -0.0007）÷W V 樣總：加入提取液體積，2ml；V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.108ml；W：樣品質(zhì)量，g

*低檢出限為 10µg/g。